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食品中黃曲黴毒素的高效液相色譜法(HPLC)檢測方案


【黃曲黴毒素】


黃曲黴毒素(AFT)是一類化學結構類似的化合物,均為二氫呋喃香豆素的衍生物。黃曲黴毒素是主要由黃曲黴 (aspergillus flavus)和寄生曲黴 (a.parasiticus)産生的次生代謝産物,主要有B1,B2,G1,G2 以及另外兩種代謝産物M1,M2,其中M1 和M2是從牛奶中分離出來的。B1為毒性及緻癌性最強的物質。在濕熱地區食品和飼料中出現黃曲黴毒素的機率最高。它們存在于土壤、動植物、各種堅果中,特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麥等糧油産品,是黴菌毒素中毒性最大、對人類健康危害極為突出的一類黴菌毒素


【樣品溶液的制備】


大米、玉米、小麥、花生及其制品:準确稱取經過磨細(粒度小于 2 mm)的試樣以及植物油脂:準确稱取試樣 25. 0 g于 250 mL具塞錐形瓶中(植物油:稱取10g先用正己烷溶解,再用甲醇水溶解提取),加入 5. 0 g氯化鈉及加人甲醇一水(7+3)至100.0 mL,以均質器高速攪拌提取 2 min。離心5min(轉速6000r/min),準确移取上清液 15. 0mL 濾液置50ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,用微孔濾膜(0.45um)濾過,量取濾液20.0ml,通過免疫親合柱,流速3ml/min,用水20ml洗脫,洗脫液棄去,使空氣進入柱子,将水擠出柱子,再用适量甲醇洗脫,收集全部洗脫液,置2ml量瓶中,并用甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。


【色譜條件】


碘衍生法色譜條件:

檢測器:熒光檢測器;XE:360nm,EM:440nm

碘衍生法:衍生泵流速:0.2mL/min; 衍生化溫度70℃

流動相:(甲醇-乙腈)-水

流速:1.0mL/min

柱溫:35℃

進樣量:20uL


圖1.jpg 


檢測限:

AFG2:0.061ng/mL

AFG1:0.15 ng/mL

AFB2:0.04 ng/mL

AFB1:0.05 ng/mL


光化學衍生法色譜條件:

檢測器:熒光檢測器;XE:360nm,EM:440nm

光化學衍生法:254nm紫外燈光照衍生

流動相:(甲醇-乙腈)-水

流速:1.0mL/min

柱溫:35℃

進樣量:20uL


圖3.jpg


檢測限:

AFG2:0.023ng/mL

AFG1:0.083 ng/mL

AFB2:0.018 ng/mL

AFB1:0.077 ng/mL


高效液相色譜儀器配置】


高效液相色譜儀器配置

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